LED生物熒光顯微鏡是目前在光鏡水平對特異蛋白質(zhì)等生物大分子定性定位研究的最有力工具之一。熒光顯微鏡技術(shù)主要是用于檢測細(xì)胞上的特異熒光材料，與普通光學(xué)顯微鏡不同的是熒光顯微鏡增加了兩套濾光片。第一套稱為激發(fā)光濾片，裝在光源和樣品之間，只有那些能激發(fā)熒光材料發(fā)光的特定波長的光才能通過。第二套稱為阻斷濾片，裝在物鏡和目鏡之間，只讓燃料所發(fā)出的熒光通過。在黑暗背景的襯托下，發(fā)出熒光的樣品很容易被觀察。
熒光顯微鏡技術(shù)包括免疫熒光技術(shù)和熒光素直接標(biāo)記技術(shù)。例如，將標(biāo)記熒光素的純化肌動(dòng)蛋白顯微注射入培養(yǎng)細(xì)胞中，可以看到肌動(dòng)蛋白分子組裝成肌動(dòng)蛋白纖維?？蓪a(chǎn)生熒光的綠色熒光蛋白(greenfluorescent，GFP)基因與某種蛋白質(zhì)基因融合，在表達(dá)這種融合蛋白的細(xì)胞中，便可直接在活體狀態(tài)下觀察到該蛋白在活細(xì)胞內(nèi)的動(dòng)態(tài)變化。不同熒光素的激發(fā)波長范圍不同，所以同一樣品可以用兩種以上的熒光素標(biāo)記，同時(shí)顯示不同成分在細(xì)胞中的定位。
LED生物熒光顯微鏡多采用200W的超高壓汞燈作光源，它是用石英玻璃制作，中間呈球形，內(nèi)充一定數(shù)量的汞，工作時(shí)由兩個(gè)電極間放電，引起水銀蒸發(fā)，球內(nèi)氣壓迅速升高，當(dāng)水銀*蒸發(fā)時(shí)，達(dá)到50～70個(gè)標(biāo)準(zhǔn)大氣壓力，這一過程一般約需5～15min。
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